薄層色譜矽膠板的操作

薄層色譜矽膠板包括：吸附劑的選擇、薄層板的製作、展開劑的選擇、點樣、展開、定位於顯色、薄層層析的定量。

1.吸附劑的選擇：

常用的薄層層析吸附劑有矽膠、氧化鋁、纖維素、聚酰胺等。首先決定於樣品成分的性質，即它們的溶解性、酸堿性、極性以及是否與吸附劑起化學反應等；其次要考慮吸附劑、載體是否容易得到及其價格等。

2.薄層板的製作：

層析板是用專門的塗布器把漿狀的吸附劑（紙漿、纖維素、矽膠、中性氧化物、聚酰胺、多孔性玻璃粉，矽烷化鍵合矽膠等）均勻地塗在在薄層板（玻璃板、金屬板或彈性塑料板）上，幹燥（110℃活化）後即可使用。

3.薄層層析中展開劑的選擇：

主要根據極性的不同來選擇流動相展開劑。各種展開劑按其極性不同排序為：烷烴<烯烴<醚類<硝基化合物<二甲胺<酯類<酮類<醛類<硫醇<胺類<酰胺<醇類<酚類<羧酸

在具體工作中，展開劑的選擇還必須進一步通過實踐，一般可用下列三種方法：

(1)查閱文獻；

(2)微型薄層：用小玻片鋪上薄層，用各種經初步選擇認為可能應用的展開劑展開，從而選擇適當的展開劑，再用於一般的薄層層析。用微型薄層，節省材料和時間；

(3)微量圓環技術。

4.點樣

(1)樣品溶液一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等揮發性有機溶劑，最好用與展開劑極性相似的溶劑溶解試樣，配成0.5%~1%的試液。

(2)點樣量：點樣量的多少與薄層的性能、厚薄及顯色劑的靈敏度有關。一般來說，樣品量最小為幾ng，常用量為幾至幾十µg，製備型的分離可以點樣到mg量。總之點樣量隨分離目的而定。

(3)點樣方式：最好是直徑3—5mm的圓點。常用點樣方式包括a.一般點樣，b.徑向點樣，c.條狀點樣，d.線形小孔點樣，e.樣品填入溝槽。

(4)點樣容器：定容毛細管、微量注射器、點樣器。

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