薄層色譜矽膠板

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薄層色譜矽膠板的操作

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薄層色譜矽膠板的操作

發布日期:2016-07-27 作者: 點擊:

薄層色譜矽膠板包括:吸附劑的選擇、薄層板的製作、展開劑的選擇、點樣、展開、定位於顯色、薄層層析的定量。


薄層色譜矽膠板


1.吸附劑的選擇:

常用的薄層層析吸附劑有矽膠、氧化鋁、纖維素、聚酰胺等。首先決定於樣品成分的性質,即它們的溶解性、酸堿性、極性以及是否與吸附劑起化學反應等;其次要考慮吸附劑、載體是否容易得到及其價格等。

2.薄層板的製作:

層析板是用專門的塗布器把漿狀的吸附劑(紙漿、纖維素、矽膠、中性氧化物、聚酰胺、多孔性玻璃粉,矽烷化鍵合矽膠等)均勻地塗在在薄層板(玻璃板、金屬板或彈性塑料板)上,幹燥(110℃活化)後即可使用。

3.薄層層析中展開劑的選擇:

主要根據極性的不同來選擇流動相展開劑。各種展開劑按其極性不同排序為:烷烴<烯烴<醚類<硝基化合物<二甲胺<酯類<酮類<醛類<硫醇<胺類<酰胺<醇類<酚類<羧酸

在具體工作中,展開劑的選擇還必須進一步通過實踐,一般可用下列三種方法:

(1)查閱文獻;

(2)微型薄層:用小玻片鋪上薄層,用各種經初步選擇認為可能應用的展開劑展開,從而選擇適當的展開劑,再用於一般的薄層層析。用微型薄層,節省材料和時間;

(3)微量圓環技術。

4.點樣

(1)樣品溶液一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等揮發性有機溶劑,最好用與展開劑極性相似的溶劑溶解試樣,配成0.5%~1%的試液。

(2)點樣量:點樣量的多少與薄層的性能、厚薄及顯色劑的靈敏度有關。一般來說,樣品量最小為幾ng,常用量為幾至幾十µg,製備型的分離可以點樣到mg量。總之點樣量隨分離目的而定。

(3)點樣方式:最好是直徑3—5mm的圓點。常用點樣方式包括a.一般點樣,b.徑向點樣,c.條狀點樣,d.線形小孔點樣,e.樣品填入溝槽。

(4)點樣容器:定容毛細管、微量注射器、點樣器。


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