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柱層層析矽膠粉的操作方法

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柱層層析矽膠粉的操作方法

發布日期:2016-07-27 作者: 點擊:

柱層層析矽膠粉的操作要點:裝柱前柱底要墊一層脫脂棉以防吸附劑外漏。


柱層層析矽膠粉


有幹法裝柱和濕法裝柱兩種方法:

1.幹法裝柱:將矽膠通過漏鬥裝入柱內,中間不應間斷,形成一細流慢慢加入管內。也可用橡皮槌輕輕敲打柱矽膠柱使矽膠裝填連續均勻、緊密。柱裝 好後,打開下端活塞,然後倒入洗脫劑洗脫以排盡柱內空氣,並保持一定液麵。 

2.濕法裝柱:將最初準備使用的洗脫劑裝入柱內,打開下端活塞,使洗脫劑緩慢流出。然後把矽膠慢慢連續不斷地倒入柱內(或將矽膠與適量洗脫劑調成混懸液慢慢加入柱內),矽膠依靠重力和洗脫劑的帶動,在柱內自由沉降,此間要不斷把流出的洗脫劑加回柱內保持一定的液麵,直至把矽膠加完並在柱內沉降不再變動為止。然後在矽膠上麵加一小片濾紙或少許脫脂棉。根據加樣量控製洗脫劑液麵至一定高度。

3.勻漿法:攪成勻漿。加入幹矽膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體係,就用石油醚拌;如果洗脫劑是氯仿/醇體係,就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿,說明溶劑中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不與水配伍走分配色譜的話,必須預先用無水硫酸鈉久置幹燥。氯仿用無水氯化鈣幹燥,以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感,不能用氯仿體係過柱。


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