薄層色譜矽膠板的選用要求

薄層色譜法的操作方法包括薄層色譜矽膠板的選用、點樣、展開、顯色、檢視與記錄五個步驟。同時，在使用過程中，經常會遇到拖尾、邊緣效應、S形及波形斑點、念珠狀斑點及Rf值不穩定等問題。

薄層板的選用：

目前，實驗室已普遍采用市售高效薄層板，以矽膠G型板最為常見，相對於自製薄層板來說分離效果更好。由於矽膠表麵的pH值約為5，比較適合於酸性和中性物質的分離，如有機酸、酚類、醛類等。堿性物質能與矽膠作用，展開時易被吸附於原點不動或出現斑點拖尾現象。在自製薄層板時可用稀堿溶液製備薄層使其變為堿性，或用堿性展開劑展開，從而得到理想的圖譜。

對薄層板的質量要求：厚度均勻一致、表麵平整光滑、無麻點氣泡、無破損汙染。自製薄層板時，要控製好鋪板用的勻漿稠度，過稠則板麵容易出現層紋，過稀則幹後表麵粗糙；使用前一般應於110℃下活化30 min，活化後置幹燥器中備用。市售板在陰涼幹燥處保存，可直接使用。

Rf值不穩定的各因素：

1.溫濕度

溫濕度不穩定。層析時室溫差控製在5℃之間。其他條件相同，溫度低比溫度高展開慢，分離好。濕度可能主要影響薄層板的吸附能力，導致選擇性( 容量因子) 的變化。濕度應根據實際情況確定，可通過反複實驗進行相應的調整。一般來說，濕度較低時，分離效果較好。

2.展開劑

展開劑的極性越大，對待定化合物的洗脫能力也越大。

3.薄層厚度

板厚度變化對比移值影響明顯。厚度達0.2mm時，影響較小；在0.25mm，分離效果最佳。

4.吸附劑含水量

與吸附劑的種類、使用時的加水量、風幹時間、活化溫度、活化時間等因素有關。

5.層析缸中蒸汽

缸中蒸汽未達飽和時，比移值不能重現。為使缸中蒸汽飽和，可以在缸內壁附上一層濾紙，讓展開劑全部濕潤；把展開劑放入層析缸一段時間後再放薄層板；盡可能在恒定溫度下層析。

6.其他因素

展開劑的pH、展開時間、展開距離、樣品濃度、點樣量、薄層板所用吸附劑中的粘合劑的種類和用量等。

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